關于PCR實驗室的裝修與設計

PCR實(shi)驗(yan)(yan)室又叫基因(yin)擴增實(shi)驗(yan)(yan)室。PCR是(shi)聚合(he)酶(mei)鏈(lian)式反應的(de)簡稱。是(shi)一種分(fen)子生(sheng)物(wu)學技術，用于放大特定的(de)DNA片(pian)段(duan)，可看作生(sheng)物(wu)體外的(de)特殊(shu)DNA復制。通(tong)過DNA基因(yin)追蹤系統，能(neng)迅速掌握患者(zhe)體內的(de)病毒含量，其精(jing)準度(du)高達納(na)米級別。

1、建立(li)(li)樣品準(zhun)備區（在(zai)前PCR區建立(li)(li)PCR混合(he)物）。

2、樣品準備。

3、建立前PCR區。

4、PCR實驗室試劑的操作。

5、在前PCR區建立PCR混(hun)合物。

可以(yi)(yi)把即刻可用(yong)的(de)(de)“主混(hun)合物”溶(rong)液配(pei)好(hao)、分(fen)裝并(bing)保存在-20℃或(huo)4℃，在實驗室只涉及到擴(kuo)增(zeng)一種或(huo)少數幾種特異序(xu)列時這樣做很有(you)用(yong)。如(ru)果你的(de)(de)實驗室使用(yong)多套引物，以(yi)(yi)致于配(pei)制(zhi)包括所有(you)試劑(ji)的(de)(de)單一反應(ying)混(hun)合物不夠(gou)經濟(ji)，可以(yi)(yi)考慮分(fen)裝保存夠(gou)一天的(de)(de)PCR成分(fen)。

作(zuo)為(wei)一個規(gui)則(ze)，應該保存一套(tao)陰性(xing)、弱陽性(xing)和強陽性(xing)對照樣(yang)品(pin)來(lai)(lai)分析(xi)樣(yang)品(pin)配制(zhi)(zhi)和PCR前(qian)過(guo)程(cheng)的效率(lv)和潔凈程(cheng)度。而且(qie)，你也希望通過(guo)使用(yong)一個已(yi)知的弱陽性(xing)樣(yang)品(pin)來(lai)(lai)驗證(zheng)你的樣(yang)品(pin)緩(huan)沖液以(yi)證(zheng)明里面不含擴增抑(yi).制(zhi)(zhi)物(wu)。

陰性樣(yang)(yang)品要與(yu)每組樣(yang)(yang)品同時做，以(yi)分(fen)析是(shi)否(fou)存在(zai)樣(yang)(yang)品與(yu)樣(yang)(yang)品之間的污(wu)染以(yi)及(ji)是(shi)否(fou)存在(zai)PCR產物的污(wu)染，陰性對照(zhao)應該包括核酸(suan)以(yi)外的所(suo)有(you)試劑。

當(dang)做(zuo)陽性(xing)對照時，有兩(liang)個理由決(jue)定(ding)了應該使用z少數量的核酸。

由于必須(xu)有(you)對照反應，對照模板的特點(dian)應該予以考慮(lv)。

6、控制污(wu)染的(de)方法(fa)。

7、PCR實驗室的(de)(de)(de)后(hou)PCR區(qu)PCR完成以后(hou)，需要分(fen)析樣品并解釋數據，應(ying)該留出一個專門用(yong)于反應(ying)后(hou)處理樣品的(de)(de)(de)地方。后(hou)PCR活動(dong)中使用(yong)的(de)(de)(de)所用(yong)試劑(ji)、一次性耗材和儀(yi)器都必須是專門用(yong)于這一目的(de)(de)(de)，決不能把實驗室這一區(qu)域的(de)(de)(de)試劑(ji)或儀(yi)器用(yong)于任(ren)何(he)前PCR活動(dong)。

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