PCR實驗室的設計與施工

平面布(bu)局

某醫院(yuan)PCR實(shi)驗室平面(mian)布局，整個(ge)區(qu)域(yu)有一個(ge)公用走(zou)廊，每個(ge)單獨實(shi)驗區(qu)設置(zhi)有專(zhuan)門的緩沖區(qu)。通過壓差控制，使(shi)整個(ge)PCR實(shi)驗過程中試劑(ji)和(he)標本免受氣溶膠的污染，并(bing)且(qie)降低擴(kuo)增產物對(dui)人員和(he)環(huan)境的污染。

壓力梯度控制

試劑準備(bei)區(qu)和標本制備(bei)區(qu)呈相對正壓狀態，以防止外(wai)界(jie)含(han)核酸氣(qi)溶(rong)膠的空氣(qi)進入，造成污染。

核(he)酸擴(kuo)增室及(ji)產(chan)物分析區應呈相對負壓狀態，以防(fang)止含核(he)酸的(de)氣溶膠(jiao)擴(kuo)散出去污染(ran)試劑與(yu)樣品。建議采(cai)用5~10Pa壓差，在控制上比較容易實現。

正負壓區(qu)域(yu)緩沖(chong)室(shi)的設置

根據壓(ya)力梯度的(de)要求(qiu)，試劑配(pei)制(zhi)室和(he)樣品(pin)處理室為相(xiang)對(dui)正(zheng)壓(ya)，擴(kuo)增(zeng)室和(he)產(chan)物分析室為相(xiang)對(dui)負(fu)壓(ya)，要求(qiu)正(zheng)壓(ya)的(de)區域(yu)和(he)要求(qiu)負(fu)壓(ya)的(de)區域(yu)的(de)緩沖室內的(de)壓(ya)力設(she)計(ji)大不相(xiang)同。

正壓緩沖室符合一般正壓潔凈(jing)室的緩沖原則，主要(yao)是防(fang)止室外環境空氣(qi)中的氣(qi)溶膠進入室內。

PCR實驗室內主要設備及(ji)房(fang)間面積要求

在PCR實驗(yan)室(shi)內(nei)有大量的實驗(yan)儀器，其中一些儀器和實驗(yan)室(shi)建造有很(hen)大關(guan)系。

試劑準備區(qu)

試劑準(zhun)備(bei)區(qu)配備(bei)有2~8℃冰箱和-80℃冰箱，計算冷(leng)負荷(he)時(shi)，需要(yao)將它們(men)計算在內(nei)。房間的(de)面積(ji)宜(yi)控制在15~20㎡。

標本制備區

標本制備區配備有2~8℃冰箱和-20℃冰箱，計算冷負荷時，需要將它們計算在內。在標本制備區，還需要配備生物安全柜，用于進行提取核酸的操作。為避免提取的核酸在柜內反復循環，造成標本之間的交叉污染，出現假陽性結果，該區域配備的生物安全柜是B2型的。生物安全柜工作區垂直氣流來自實驗室，排風經過過濾器過濾后直接排至室外，不允許回到安全柜和實驗室中。

根據我們(men)的(de)經驗，如果實(shi)驗室內配(pei)備(bei)生物安(an)全(quan)柜，每配(pei)備(bei)一臺，實(shi)驗室的(de)面積增加(jia)10㎡；標(biao)本制備(bei)區的(de)面積宜在25~30㎡之間。

擴增(zeng)室

擴增室主要配備(bei)PCR實(shi)驗(yan)室的核心儀(yi)(yi)器PCR儀(yi)(yi)，本(ben)文實(shi)例中使用了ABI7500和ABI9700兩種PCR儀(yi)(yi)。在實(shi)驗(yan)室建造過程(cheng)中，需要給PCR儀(yi)(yi)配備(bei)專門(men)的UPS電源，保障(zhang)它(ta)的正常(chang)工作(zuo)。該(gai)區面積控(kong)制在15~20㎡。

產物分析區

在(zai)室(shi)內配備通風櫥，保障房間內的相(xiang)對負(fu)壓，空氣(qi)從室(shi)外流(liu)向室(shi)內。該(gai)區面積控制在(zai)15~20㎡。

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